眾所周知，動物無害化處理工作是動物疫病防 控的最后一道關(guān)口，是保障食品安全和公共衛(wèi)生安 全的重要 舉 措。作為動物無害化處理工作的重要 環(huán)節(jié)，運(yùn) 輸 車 輛 的 消 毒 顯 得 尤 為 重 要。很 多 情 況 下，動物無害化處理廠確實(shí)是對運(yùn)輸車輛進(jìn)行了消 毒，但消毒效 果 如 何 卻 無 從 得 知，是否有致病微生 物殘留也不可知。一旦發(fā)生消毒劑保存不當(dāng)、消毒 濃度配制不 合 理、預(yù)制消毒溶液失效等問題，特 別 是在重大動 物 疫 病 如 非 洲 豬 瘟、禽流感流行期間， 消毒效果得不到保障，將對動物疫病防控造成嚴(yán)重 后果。本研究主要從細(xì)菌殺滅率、病毒殺滅情況兩 個方面對運(yùn)輸車輛消毒效果進(jìn)行綜合評估，為開展 相關(guān)工作提供數(shù)據(jù)支撐。

主要成分為月芐三甲氯銨，購自上海騎驃動物保健品公司，用于運(yùn)輸車輛沖 洗 消 毒；益歐迪復(fù)合消毒藥，主要成分為癸甲溴銨、碘，購自上海康利得動物藥品有限公 司，用于運(yùn)輸 車 輛 噴 霧 消 毒；消毒溶液濃度均按照 推薦濃度配比使用。

本文所指運(yùn)輸車輛為新型動物 無害化收集轉(zhuǎn)運(yùn)特種車輛，該車輛在全國動物無害 化處理領(lǐng)域內(nèi)率先被國家工信部批準(zhǔn)為特種車輛， 并配備 了 消 毒 噴 霧 設(shè) 施、ＧＰＳ定 位 系 統(tǒng)、車 輛 行 車 跟蹤記錄系統(tǒng)、防污水泄漏裝置等。

ＰＣＲ儀、水平凝膠電泳儀、凝 膠 成 像 系 統(tǒng) （Ｂｉｏ－ｒａｄ，型 號 ＧｅｌｄｏｃＥＺ）、 高 速 冷 凍 離 心 機(jī)（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，型 號 ＰｒｉｍｏＲ）、 生 物 安 全 柜（ＥＳＣＯ，型 號 ＡＣ２－４Ｓ１）、超 凈 工 作 臺 （蘇 凈 安 泰，型 號 ＳＷ－ＣＪ－１Ｆ）、隔 水 式 恒 溫 培 養(yǎng) 箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司，型 號 ＧＮＰ９０５０）、 漩 渦 混 合 器 （海門其林貝爾儀器制造 有限公司， 型 號 ＶＯＲＴＥＸ－５）。

豬圓環(huán)病毒２型（ＰＣＶ２）毒株由上海 創(chuàng)宏生物科技有限公司提供，病毒 ＰＣＲ陽性對照由 捷瑞生物工 程 有 限 公 司 合 成；病 毒 提 取 試 劑 盒、其 他相關(guān) 試 劑 購 自 天 根 生 化 科 技 （北 京）有 限 公 司； ０．８５％生理鹽 水（含 中 和 劑）采 樣 管 購 自 友 康 恒 業(yè) 生物科技（北京）有限公司；平板計(jì)數(shù)瓊脂購自青島 海博生物技術(shù)有限公司。

運(yùn)輸車輛駛離動物無害化處理 廠前，需要進(jìn)行沖洗消毒和噴霧消毒。沖洗消毒使 用月芐三甲氯銨溶液，每次沖洗消毒時水流均完全 覆蓋車廂內(nèi)外表面，至少３次；噴霧消毒使用益歐迪 復(fù)合消毒藥，６８對霧化噴頭噴霧，噴霧時間３０ｓ，霧 粒直徑為５０～６０μｍ，霧粒完全覆蓋運(yùn)輸車輛車廂 外表面（包括車廂頂部）。

（１）采 樣 時 間：運(yùn) 輸 車 輛 駛 入 動 物 無 害化處理廠 大 門 前，對 其 車 廂 外 表 面 進(jìn) 行 采 樣；卸 貨完畢，沖洗消毒前，對車廂內(nèi)表面進(jìn)行采樣；沖洗 消毒和噴霧消毒后，運(yùn)輸車輛駛離動物無害化處理 廠大門前，對其車廂內(nèi)、外表面進(jìn)行采樣。

（２）采樣 方法：用 ５ｃｍ×５ｃｍ 的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢 車廂表面，連續(xù)采樣４個，內(nèi)、外表面采樣面積均為 １００ｃｍ２，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水棉拭 子１支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各５次，并隨 之轉(zhuǎn)動棉拭子，將棉拭子投入１０ｍＬ含相應(yīng)中和劑 的無菌生理鹽水采樣管內(nèi)，立即送檢。

本報告選取１輛死亡動物運(yùn)輸車 輛駛?cè)肭啊⑾厩啊Ⅰ傠x前監(jiān)測樣品，漩渦混合器震 蕩混勻２０ｓ后，使 用 １ ｍＬ 微量移液器吸取樣品１ｍＬ，沿管壁緩緩注入盛有９ｍＬ 無菌生理鹽水的 試管中，震蕩試管混合均勻，制成１∶１０樣品勻液，以 此類推，分別將樣品１∶１００、１∶１０００、１∶１００００…… 進(jìn)行１０倍遞增稀釋，每個稀釋度吸取１ｍＬ樣品勻 液于無菌平皿內(nèi)，每個稀釋度做２個平皿，同時，分 別吸取１ｍＬ空白稀釋液加入２個無菌平皿內(nèi)作為 空白對照。及時吸取１５～２０ｍＬ冷卻至４６ ℃的平 板計(jì)數(shù)瓊脂 培 養(yǎng) 基傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。待 瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，（３６±１）℃培養(yǎng)（４８±２）ｈ， 取出進(jìn)行 細(xì) 菌 計(jì) 數(shù)。本次樣品中可能含有在瓊脂 表面彌漫生長的菌落，因此可在凝固的瓊脂表面覆 蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約４ｍＬ），凝固后翻轉(zhuǎn)平板， 按照上述條件進(jìn)行培養(yǎng)。

本報告選取１輛死亡動物運(yùn)輸車輛監(jiān)測細(xì)菌殺 滅情 況，結(jié)果表明該車 輛內(nèi)表面細(xì)菌殺滅率 ≥ ９０％，具體見表２、表３。

３ 結(jié)果分析
　　

從細(xì)菌殺滅率、病毒殺滅情況兩個 方面對運(yùn) 輸 車 輛 消 毒 效 果 進(jìn) 行 綜 合 評 估。從 樣 品 的監(jiān)測結(jié)果來看，死亡動物運(yùn)輸車輛駛?cè)雱游餆o害化處理廠直至離開，經(jīng)過卸貨、消毒，車輛外表面細(xì) 菌殺滅率≥９０％，確保了該類車輛在城市道路行駛 期間的公共衛(wèi)生安全；同時本研究對車廂內(nèi)表面病 毒殘留進(jìn)行 監(jiān) 測，發(fā)現(xiàn)在未經(jīng)消毒情況下，車 廂 內(nèi) 表面血污水污染較為嚴(yán)重，采集樣品中發(fā)現(xiàn) ＰＣＶ２ 陽性，經(jīng)過消 毒 處 理 達(dá) 到 ＰＣＶ２ 陰性，確 保 了 該 車 輛在養(yǎng)殖場、收集點(diǎn)等需要打開車廂進(jìn)行裝卸病死 動物過程中不會造成病原擴(kuò)散。 運(yùn)輸車輛可能攜帶的致病微生物必須引起重 視。運(yùn)輸 過 程 中，由 于 病 死 動 物 個 體 太 大 無 法 包 裝、包裝物不密封、血污水滲漏等原因，導(dǎo)致運(yùn)輸車 輛車廂污 染 較 為 嚴(yán) 重。筆者對車廂內(nèi)表面消毒前 血污水樣品進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)血污水中可能殘留有大 量的致病 微 生 物。本 研 究 選 取 ＰＣＶ２ 作為 特 定 病 原微生物對運(yùn)輸車輛消毒效果進(jìn)行判定，旨在引起 行業(yè)內(nèi)相關(guān)工作人員對運(yùn)輸車輛消毒效果評估的關(guān)注。