1 材料與方法
1.1 實 驗 動 物、藥 物、主 要 試 劑 和 儀 器
雄 性 Wistar大鼠70只,體質量為180~230g,由長春 億斯實驗動物技術有限責任公司提供,動物許可證 號:SCXK (吉)2016-0003。大鼠采取分籠飼養, 自由攝 食 飲 水,室 溫 21℃ ~24℃,濕 度 40% ~ 60%,適應環境5d后用于實驗。實驗大鼠的普通飼料和高脂飼料均購于吉林省長春市億斯實驗動物 技 術 有 限 責 任 公 司, 高 脂 飼 料 含 碳 水 化 合 物 53.3%、 酪 蛋 白 20.0%、 豬 油 10.0%、 蔗 糖 5.0%、膽固醇2.0%和其他9.7%。SCP由東 北 師 范 大 學 生 命 科 學 中 心 制 備[13]。 STZ購自美國 Sigma-Aldrich公司,葡萄糖試劑盒 由中生北控生物科技股份有限公司提供,INS放射 免疫分析試劑盒由上海朗頓生物科技有限公司提 供,大 鼠 白 細 胞 介 素 6 (interleukin-6,IL-6)、 CRP、IL-1β、TNF-α和 NF-κBELISA 檢測試劑盒 均購于上海碧云天生物技術有限公司。S10手提式 高速分散器 (寧波新生生物科技股份有限公司), InfiniteM200全自動酶標儀 (瑞士 TECAN 集團 公司),MH-1微量振蕩器 (海門市其林貝爾儀器制造有限公司)。
1.2 實驗動物分組、造模和處理
Wistar大鼠 70只,隨機選?。保爸蛔鳛檎φ战M,飼喂普通 飼料;其余60只大鼠飼喂高脂飼料4周后一次性 腹腔注射 STZ30 mg·kg-1,建 立 T2DM 模 型。 正常對照組大鼠給予等體積枸櫞酸緩沖液。1周后 檢測大鼠空腹血糖 (fastingbloodglucose,FBG), FBG≥7.0 mmol·L-1表示造模成功。將糖尿 病模 型 大 鼠 隨 機 分 為 模 型 組 及 低、中 和 高 劑 量 SCP組,每組10只。正常對照組和模型組大鼠給 予等體積生理鹽水,低、中和高劑量 SCP 組分別 給予 25、50 和 100 mg·kg-1 SCP 灌 胃, 每 天 1次,連續8周。
1.3 口服葡萄糖耐量實驗
(oralglucosetolerance test,OGTT) 各 組 大 鼠 給 藥 治 療 8 周 后 進 行 OGTT,實驗前各組大鼠禁食 12h,灌胃給予葡 萄糖2.5g·kg-1,分別于灌胃前 (0min)及灌胃 后30、60和120min 采集大鼠眼內眥部血樣,測 定血 糖 水 平 ,計 算 血 糖 曲 線 下 面 積(AUC)。
2 結 果
與 正常對照組比較,模型組大鼠 FBG 水平明顯升高 (P<0.01),INS水平和ISI明顯降低 (P<0.05或 P<0.01),提示 T2DM 大鼠建模成功。與模型組 比較,各劑量SCP組大鼠血清中 FBG 水平均明顯 降低 (P<0.05或 P<0.01),但仍高于正常對照 組 (P<0.05或P<0.01);各劑量 SCP組大鼠血 清中INS 水 平 和 ISI均 明 顯 升 高 (P <0.05 或 P<0.01),但仍低于正常對照組(P<0.05)。與低 劑量SCP組比較,中和高劑量組大鼠 FBG 水平明 顯降低 (P<0.05),高 劑 量 SCP 組 大 鼠 血 清 中 INS水平明顯升高 (P<0.05)。
3 討 論
五味子始載于 《神農本草經》,具有解除因體 液不足和糖尿病引起的口渴的功能。1993年張志 軍首次明確了五味子對臨床糖尿病患者具有改 善血 糖 和 糖 化 血 紅 蛋 白 (HbA1C) 的 作 用。 研 究顯示:SCP能明顯降低糖尿病模型小鼠體質 量,減輕煩渴、多尿和高血糖表現,促進肝糖原生 成,改善小鼠糖尿病的脂質代謝紊亂。本研究結果 也顯示:SCP可明顯降低高脂飲食聯合 STZ誘導 的 T2DM 大 鼠 FBG,升 高 血 清 INS 水 平,提 高 ISI,顯示出對 T2DM 良好的治療效果。
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